TFA去除: 多肽转换为乙酸盐形式

为什么要去除TFA?

在多肽固相合成过程中，三氟乙酸（TFA）经常被用来将多肽从固相树脂上切割下来。在反相HPLC纯化多肽的过程中，也会用到三氟乙酸或醋酸。但如果是用于临床前和临床研究中的多肽，残留的三氟乙酸或氟化物将会是有毒的和不受欢迎的。

公司合成的多肽一般都是TFA盐形式。如果残留TFA会影响您的实验，我们通常建议转化为其他盐，如醋酸和盐酸盐形式。这些盐形式的多肽通常要比TFA盐费用多20％至30％，这是由于在转盐的过程中会损失部份多肽，而且需要更多的原材料。

TFA可能会带来很多问题。因此，我们可以去除TFA盐，从一开始就避免他们。

TFA是一种强酸。它可以质子化任何氨基。盐酸也是这样。在纯化多肽过程中的反相HPLC，有一种技术是阴离子交换。将多肽加载在柱子上，保持它在顶部，同时用足量的乙酸缓冲液洗涤，然后用乙酸水溶液/乙腈作梯度洗脱。冷冻干燥后，抗衡离子TFA被交换。该技术依赖于多肽的疏水性。一个亲水性高的多肽将需要一个合适的阴离子交换树脂。

泽溪源使用一种特殊的反相C-18材料，提供了很好的分离法从而去除TFA。TFA、醋酸和氟化物的分离需用到由烷基季铵基团功能化的固定相。来自分析柱的洗脱液流经suppressor，降低了洗脱液的总背景电导，增强了分析物离子的电导。通过抑制电导，信噪比比非抑制电导改善了约50倍。